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Terminal deoxynucleotidyl transferase

TdT末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl transferase)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3' 羟基端,带有突出、凹陷或平滑末端的单、双链DNA分子均可作为TdT 的底物。

特点

  • 聚合反应时可掺入修饰的核苷酸(如荧光素、生物素、氨基标记的核苷酸)。

应用

  • 催化DNA的3' 末端添加同聚物。
  • 利用修饰碱基(如ddNTP,DIG-dUTP)标记DNA 3' 末端。
  • dUTP 缺口末端标记(细胞凋亡的原位检测)。

来源:
大肠杆菌细胞,含有编码牛胸腺末端脱氧核苷酸转移酶的基因。

活性单位定义:
是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。

保存条件:
-20℃保存。

抑制和失活:
抑制剂:金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子。
失活:加入EDTA,或70℃加热10分钟。

备注:
由于含有CoCl2,TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容,需采用柱离心法或苯酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物,除去CoCl2。

质量控制:
相关测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶污染。通过蓝白克隆。

 

订购信息

  

编号

单位活性

包装

配套提供

EN2001S

20U/ul

500U

5×Reaction Buffer

EN2001L

20U/ul

2500U

5× Reaction Buffer